HRP konjugeeritud Arachis – Gentaur Lab Reagents Estonia

Kokkuvõte

Maapähkli (Arachis hypogaea) aglutiniini (PNA) kasutatakse laialdaselt kasvajavastasena, see tunneb kindlalt ära kõige vähivormid, eriti T-antigeeni (Galbeta1–> 3GalNAc-), kuid mitte selle sialüleeritud mudelit. Sellegipoolest oli PNA -le omistatud täiendav spetsiifilisus Galbeta1–> 4GlcNAc (LacNAc) suunas, mis ei ole kasvaja.

Lektiini histokeemiliste tulemuste õigeks tõlgendamiseks uurisime PNA suhkruspetsiifilisust, kasutades looduslikult esinevaid või poolsünteetilisi glükoproteiine, maatriksiga immobiliseeritud galaktosiide ja lektiini siduvaid koe glükoproteiine, mõistlikult kui mono- või disahhariide ligandidena. Lahustuvate glükokonjugaatide punkt-blotid, lülitusplokid või polüstüreenplaatkatted on sonditud PNA mädarõika peroksidaasi (HRP) konjugaatidega ja erinevate tunnustatud spetsiifilisusega lektiinidega. PNA-d siduvate glükoproteiinide modifikatsioonid koos O-seotud oligosahhariidide selektiivse eemaldamise ja raviga glükosidaasidega näitasid, et Galbeta1–> 4GlcNAc (LacNAc) oli ebaefektiivne, samas kui terminaalne alfa-seotud galaktoos (TAG) lisaks katmata T-antigeenile (Galbeta1–>) Kolm GalNAc-) oli suurepärane kui suhkruosa glükoproteiinides, et teda PNA ära tunda. Immobiliseerimisel oli melibioos PNA sidumisel parem laktoosist. Tulemused on kinnitatud, kasutades TAG-spetsiifilist inimese seerumi alfa-galaktosiidivastast antikeha.

Arachis hypogaea (maapähkli) lektiin (PNA) – HRP

Afiinsusega puhastatud PNA on konjugeeritud mädarõika peroksidaasi (HRP) ensüümiga. HRP -d kasutatakse enamasti blotimiseks, immuunanalüüsideks ja immunohistokeemia strateegiateks. See on 40 kDa valk, mis katalüüsib substraatide oksüdeerumist vesinikperoksiidi toimel, mille tulemuseks on värviline või fluorestseeruv toode või päikesepaiste kui reaktsiooni kõrvalsaadus. See toode on saadaval stabiliseeritud vedelas vormis. HRP-märgistatud valgu tuvastamise substraadi kasutamiseks pakume meie intensiivse kemoluminestsentsi (ICLTM) seadet (SKU: 20810000). ICL on kahekomponentne substraat, mis sisaldab ühtlast luminoolivastust koos võimendajaga ja ühtlast peroksiidpuhvri vastust. Sellel on võimas õrn emissioon ja tundlikkus pikogrammi astmes, mis on äärmiselt sobiv HRP-konjugeeritud valkude kiireks tuvastamiseks. Kemoluminestseeruvate substraatide eelised erinevate avastamisstrateegiate ees sisaldavad mitmeid kokkupuuteid, samuti saab plekke korrata, tuvastab ja kvantifitseerib mitmesuguseid valgu kontsentratsioone ning annab suurima tundlikkuse mis tahes tehnika suhtes. Lisaks pakume 3, 3, 5, 5- Tetrametüülbensidiin (TMB, SKU: 42000012) ja TMB OneTM (TMB 1) HRP substraat HRP märgistatud tuvastamiseks. TMB on sobiv substraat mädarõika peroksüdaasi immuunanalüüsiks ja on bensidiini mittekantserogeenne kõrvalsaadus, mille neeldumine on 450 nm juures. TMB oksüdeerimisel HRP abil saadakse värviline produkt. s TMB 1TM on ühe elemendiga peroksidaasi substraat (SKU: 21530073). ja annab suurima tundlikkuse mis tahes tehnika kohta. Lisaks tarnime HRP märgistatud tuvastamiseks 3, 3, 5, 5-tetrametüülbensidiini (TMB, SKU: 42000012) ja TMB OneTM (TMB 1) HRP substraati. TMB on sobiv substraat mädarõika peroksidaasi immuunanalüüsiks ja on bensidiini mittekantserogeenne kõrvalsaadus, mille neeldumine on 450 nm juures. TMB oksüdeerimisel HRP abil saadakse värviline produkt. s TMB 1TM on ühe elemendiga peroksidaasi substraat (SKU: 21530073). ja annab suurima tundlikkuse mis tahes tehnika kohta. Lisaks tarnime HRP märgistatud tuvastamiseks 3, 3, 5, 5-tetrametüülbensidiini (TMB, SKU: 42000012) ja TMB OneTM (TMB 1) HRP substraati. TMB on sobiv substraat mädarõika peroksüdaasi immuunanalüüsiks ja on bensidiini mittekantserogeenne kõrvalsaadus, mille neeldumine on 450 nm juures. TMB oksüdeerimisel HRP abil saadakse värviline produkt. s TMB 1TM on ühe elemendiga peroksidaasi substraat (SKU: 21530073).

Tarkvara

Ühine Western Blot protokoll:

Glükoproteiini mustri mõõtmed: 500 ng
Lektiini fookus: 0,1 ug/ml

Laadige proovid 500 ng glükoproteiini ühe sõiduraja kohta
Käivitage 4-20% Bis-Tris SDS veebilehegeel
Lülitage geel PVDF -membraanile
Blokeerige membraan 1 tund toatemperatuuril RIPA puhvriga (R0278 Sigma)
Inkubeerige HRP lektiini 0,1 ug/ml RIPA puhvriga kaks tundi toatemperatuuril
Peske membraani 5 x 5 minutit 25 ml RIPA puhvriga
Tuvastab kemoluminestseeruva substraadi (CPS1-120)

Biochem/Physiol Actions

PNA ei aglutineeri tavalisi inimese erütrotsüüte, kuid aglutineerib tugevalt neuraminidaasiga töödeldud erütrotsüüte. PNA-l on tugev T-vastane harjutus, mis sarnaneb inimese seerumite T-vastase antikehaga. Lektiini saab kasutada inimese lümfotsüütide alamhulkade eristamiseks.

Ühiku määratlus

Üks ühik sisestab pürogalloolist 20 sekundi jooksul 1 mg purpurogalliini pH 6 juures, null temperatuuril 20 ° C.

Kehaline tüüp

Mahutab naatriumtsitraati

Arachis hypogaea lectin (PNA)
05-0116-10	Medicago	10 mg	EUR 116

Arachis hypogaea lectin (PNA
05-0116-1000	Medicago	1 g	Ask for price

Arachis hypogaea lectin (PNA
05-0116-50	Medicago	50 mg	EUR 314

Arachis hypogaea Conglutin-7
1-CSB-EP757666ANE	Cusabio	EUR 611.00 EUR 309.00 EUR 1827.00 EUR 939.00 EUR 1218.00 EUR 397.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 22 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Conglutin-7 expressed in E.coli

Arachis hypogaea Arachin Ahy-3
1-CSB-EP737391ANE	Cusabio	EUR 611.00 EUR 309.00 EUR 1827.00 EUR 939.00 EUR 1218.00 EUR 397.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 35.9 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Arachin Ahy-3 expressed in E.coli

Arachis hypogaea Arachin Ahy-3
1-CSB-YP737391ANE	Cusabio	EUR 679.00 EUR 335.00 EUR 2172.00 EUR 1051.00 EUR 1442.00 EUR 435.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 21.9 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Arachin Ahy-3,partial expressed in Yeast

Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17
1-CSB-EP331779ANE(A4)	Cusabio	EUR 611.00 EUR 309.00 EUR 1827.00 EUR 939.00 EUR 1218.00 EUR 397.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 71.7 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17 expressed in E.coli

Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17
1-CSB-EP331779ANE	Cusabio	EUR 611.00 EUR 309.00 EUR 1827.00 EUR 939.00 EUR 1218.00 EUR 397.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 39 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17,partial expressed in E.coli

Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17
1-CSB-YP331779ANE(A4)	Cusabio	EUR 586.00 EUR 299.00 EUR 2172.00 EUR 900.00 EUR 1442.00 EUR 382.00	100ug 10ug 1MG 200ug 500ug 50ug
MW: 70.2 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P17 expressed in Yeast

Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P41B
1-CSB-CF337356ANE	Cusabio	EUR 965.00 EUR 665.00 EUR 715.00	1MG 200ug 500ug
MW: 72.8 kDa Buffer composition: Tris-based buffer with 50% glycerol.
Description: Recombinant Arachis hypogaea Allergen Ara h 1, clone P41B expressed in in vitro E.coli expression system