ChromaFlash Kromatiini Extraction Package  on terve rida optimeeritud puhvreid ja reagendid isoleerides kromatiini või DNA-valgu arenenud imetajate rakkudest või kudedest lihtne ja kiire formaadis. Selle pakendi abil valmis kromatiini saab kasutada üsna paljudes kromatiini immunosadestamise strateegiates. Lisaks on see tõesti kasulik metoodika kromatiini omandamiseks, mida nõuab Epigenteki ühe tunni ChIP metoodika, kasutades ChromaFlash’i üheastmelist ChIP-paketti. Kaugkromatiini kasutatakse ka erinevates kromatiiniga seotud funktsioonides, mis on samaväärsed in vitro valgu-DNA seondumistestide ja tuumaensüümide testidega.

• Erakordselt kiire protsess: kogu protsess alates rakkude/kudede mustrist kuni kasutusvalmis kromatiinini on alla 60 minuti.
• Käepärane ja mitmekülgne: pakend sobib iga natiivse kromatiini ja ristseotud kromatiini valmistamiseks ühekihilistest või suspensioonrakkudest või kudedest.
• Puhastamata kromatiin muudab selle kohandatavaks paljude hindamiste töövoogude jaoks, mis nõuavad nii puutumatut kui ka killustatud kromatiini koos ChIP-ga, in vitro valgu-DNA koosmõju hindamist, tuumaensüümi testi jne.

Taust Andmed
Kromatiini immunoprecipitaton (ChIP) annab soodsa seadme teada-valguga DNA koosmõju. ChIP abil saab eksperimenteerija otsustada, kas konkreetne valk seostub geenide täpsete järjestustega resideeruvates rakkudes, kombineerides neid PCR (ChIP-PCR), mikrokiibi (ChIP-kiip) või sekveneerimise (ChIP-Seq) meetoditega. Näiteks metüleeritud histooni H3 koguse mõõtmist lüsiinis 9 (meH3-K9), mis on seotud konkreetse geenipromootori piirkonnaga, mis on allpool paljusid olukordi, on võimalik saavutada ChIP-PCR testi abil, samas kui meH3-K9 värbamine genoomi hõlmavaid promootoreid saab tuvastada ChIP-kiibi abil. Eelkõige on laialt nõutud ChIP -metoodika, mis hõlmab teatud antikehi otse paljude transkriptsioonikomponentide suhtes.

Ettekirjutus ja töötlemine
ChromaFlash ™ kromatiini ekstraheerimise pakett sisaldab kõiki reaktiive, mis on vajalikud kasumliku kromatiini ekstraheerimise lõpetamiseks otse imetajate rakkudest või kudedest. Mustri rakumembraanid, ristsidemetega või ilma, kahjustatakse kaasasoleva lüüsipuhvri abil. Seejärel ekstraheeritakse ekstraheeritud kromatiini või DNA-valku ekstraheerimispuhvriga. Ekstraheeritud kromatiini võib seejärel lahjendada kromatiinipuhvriga ja hoida sobival temperatuuril.

Alustarvikud ja sisestage kogus
Alustamiseks vajalikud varud võivad hõlmata paljusid koeproove või rakuproove, mis on samaväärsed kolvi- või mikroplaadi kultiveeritud rakkude rakkudega, kaasaegsete ja külmutatud kudedega jne. Kogus rakkude ja kudede iga preparaadi võiks olla 1 x 10 ⁵  kuni viie x 10 ⁶  rakkudes ja 10 mg kuni 200 mg. Optimaalseks valmistamiseks peaks sisestatud kogus olema 1 kuni 5 x ¹⁰⁶  rakku või 50 kuni 200 mg kudesid. Saagis Kromatiini on umbes neli ig per 10 ⁶   rakke või per 50 mg kudedes.

Taust Andmed
Kromatiini immuunsadestamise (ChIP) annab soodsa seadme teada-valguga DNA koosmõju. ChIP abil saab eksperimenteerija otsustada, kas konkreetne valk seostub geenide täpsete järjestustega resideeruvates rakkudes, kombineerides selle PCR (ChIP-PCR), mikrokiibi (ChIP-kiip) või sekveneerimise (ChIP-Seq) meetoditega. Näiteks metüülitud histooni H3 koguse mõõtmist lüsiinis 9 (meH3-K9), mis on seotud konkreetse geenipromootori piirkonnaga, mis on allpool paljusid olukordi, on võimalik saavutada ChIP-PCR testi abil, samas kui meH3-K9 värbamine genoomi hõlmavaid promootoreid saab tuvastada ChIP-kiibi abil. Eelkõige on laialdaselt nõutud ChIP -metoodika, mis sisaldab konkreetseid antikehi otse paljude transkriptsioonikomponentide suhtes.